PAXgene Blood RNA程序很簡(jiǎn)單，可以使用手動(dòng)或自動(dòng)程序進(jìn)行：

1.手動(dòng) PAXgene全血RNA提取程序

     純化開(kāi)始于離心步驟以在PAXgene Blood RNA Tube中沉淀核酸。將沉淀洗滌并重懸浮，并在優(yōu)化的緩沖液中與蛋白酶K一起孵育以產(chǎn)生蛋白質(zhì)消化。通過(guò)PAXgene Shredder旋轉(zhuǎn)柱進(jìn)行另外的離心以使細(xì)胞裂解物均質(zhì)化并除去殘留的細(xì)胞碎片，并將流出級(jí)分的上清液轉(zhuǎn)移到新的微量離心管中。加入乙醇以調(diào)節(jié)結(jié)合條件，并將裂解物應(yīng)用于PAXgene RNA旋轉(zhuǎn)柱。在短暫離心期間，當(dāng)污染物通過(guò)時(shí)，RNA選擇性地結(jié)合到PAXgene二氧化硅膜上。在幾個(gè)有效的洗滌步驟中除去剩余的污染物。在第一和第二洗滌步驟之間，用DNase I處理膜以除去痕量的結(jié)合DNA。洗滌步驟后，將RNA在洗脫緩沖液中洗脫并加熱變性。

2.全自動(dòng)PAXgene全血RNA提取程序

     在QIAcube上自動(dòng)化的樣品制備遵循與手動(dòng)程序相同的步驟，使您能夠繼續(xù)使用PAXgene Blood RNA Kit純化高質(zhì)量RNA。

     自動(dòng)RNA純化方案由2部分（或方案），“PAXgene Blood RNA Part A"和“PAXgene Blood RNA Part B"組成，兩部分之間有簡(jiǎn)短的人工干預(yù)。

     將離心，洗滌和重懸的核酸沉淀從PAXgene Blood RNA Tube轉(zhuǎn)移到處理管中，將其置于QIAcube工作臺(tái)上的熱振蕩器單元中。操作員從菜單中選擇并啟動(dòng)“PAXgene Blood RNA Part A"協(xié)議。QIAcube執(zhí)行協(xié)議的步驟，直至在洗脫緩沖液中洗脫RNA。操作人員將含有純化RNA的微量離心管轉(zhuǎn)移到QIAcube的熱水瓶單元中。操作員從菜單中選擇并啟動(dòng)“PAXgene Blood RNA Part B"協(xié)議，并通過(guò)QIAcube進(jìn)行熱變性。

     平均樣品制備時(shí)間（基于來(lái)自12個(gè)樣品制備的數(shù)據(jù)）為125分鐘，僅有約20分鐘的實(shí)際操作時(shí)間。