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Fetal Bovine Serum, Australia Source
Corning® cellgro® Fetal Bovine Serum, Australia Source澳洲胎牛血清,超低內(nèi)毒素,康寧澳洲胎牛血清華雅再生醫(yī)學(xué)現(xiàn)貨供應(yīng)
康寧Corning cellgro 35-076-CV FBS澳洲胎牛血清源自潔凈的澳洲,從血源采集、加工到質(zhì)檢,整個(gè)過程遵循行業(yè)zui高標(biāo)準(zhǔn),確保zui高產(chǎn)品品質(zhì)。
產(chǎn)品技術(shù)參數(shù)(當(dāng)前批次為例)其他批次略有不同:
1. 超低血紅蛋白;
2. 內(nèi)毒素低達(dá)0.1421EU/mL;
3. 在四種細(xì)胞上進(jìn)行生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn);
心臟穿刺取血
三次100nm過濾無(wú)菌處理
康寧Corning cellgro 35-076-CV FBS Fetal Bovine Serum, Australia Source澳洲胎牛血清多次多項(xiàng)檢測(cè):
★ 生理生化檢測(cè);
★ 無(wú)菌檢測(cè);
★ 支原體檢測(cè);
★ 11種病毒檢測(cè);
★ 四種細(xì)胞的生長(zhǎng)驗(yàn)證。
康寧Corning cellgro 35-076-CV FBS澳洲胎牛血清訂購(gòu)信息:
貨號(hào) 35-076-CV Corning cellgro 澳洲胎牛血清 500mL/瓶 批次號(hào)咨詢
歡迎您致電 華雅再生醫(yī)學(xué)旗艦公司:紅榮微再(上海)生物工程技術(shù)有限公司 :152 1681 4001。華雅再生醫(yī)學(xué)-客服: 316 808 6348
Corning® cellgro® Fetal Bovine Serum, Australia Source澳洲胎牛血清,超低內(nèi)毒素,康寧澳洲胎牛血清華雅再生醫(yī)學(xué)現(xiàn)貨供應(yīng)
胎牛血清(FBS)是一種從胎牛血中分離出的無(wú)菌亮棕色液體。所有材料都符合美國(guó)農(nóng)業(yè)部規(guī)定的要求,且采集血清的動(dòng)物未患有瘋牛病、口蹄疫及其它報(bào)道的該物種疾病。
FBS胎牛血清采集:從全血中無(wú)菌提取血清并在符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的工廠中進(jìn)行加工。
康寧Corning cellgro 35-076-CV FBS Fetal Bovine Serum, Australia Source澳洲胎牛血清采集和加工:按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)通過心臟穿刺無(wú)菌采集全血。通過冷凍離心從采集的血液中分離出血清,經(jīng)正確混合后立即冷凍。只有符合我們嚴(yán)格的內(nèi)毒素、殘留血紅蛋白濃度、pH和微生物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的血清才能用于加工生產(chǎn)。
康寧Corning cellgro 35-076-CV FBS Fetal Bovine Serum, Australia Source澳洲胎牛血清包裝:產(chǎn)品裝在方形瓶中。這些瓶子經(jīng)過伽馬射線照射,可以達(dá)到zui高等級(jí)的無(wú)菌水平(10-6 SAL),并按照《美國(guó)藥典》經(jīng)過重金屬、理化屬性、細(xì)胞毒性和微生物內(nèi)毒素檢測(cè)。
FBS胎牛血清過濾:經(jīng)過混合的原料血清經(jīng)過三個(gè)串聯(lián)的0.1um級(jí)過濾器過濾。無(wú)菌血清要進(jìn)行正確混合,以確保其均勻度。在zui終包裝前還要經(jīng)過一次zui終的“拋光”過濾器過濾。經(jīng)過這些處理的血清在受控環(huán)境中進(jìn)行無(wú)菌分裝。
康寧Corning cellgro 35-076-CV FBS Fetal Bovine Serum, Australia Source澳洲胎牛血清現(xiàn)貨供應(yīng)
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zui終產(chǎn)品質(zhì)量控制
從每個(gè)生產(chǎn)批次中抽取有代表性數(shù)量的血清樣本,用下列標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分析:
pH:測(cè)量pH值是否符合產(chǎn)品規(guī)格要求。使用美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)組織可跟蹤的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)所有設(shè)備進(jìn)行校準(zhǔn)。
摩爾滲透壓濃度:測(cè)量摩爾滲透壓濃度值是否符合產(chǎn)品規(guī)格要求。使用美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)組織可跟蹤的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)所有設(shè)備進(jìn)行校準(zhǔn)。
無(wú)菌性測(cè)試:zui終產(chǎn)品的無(wú)菌性檢測(cè)旨在確認(rèn)每個(gè)生產(chǎn)批次具有代表性數(shù)量的樣本中無(wú)細(xì)菌和真菌污染,使用的方法在版的《美國(guó)藥典》中進(jìn)行了描述。
血紅蛋白測(cè)試:為了證明生產(chǎn)過程遵從了正確的采集和加工程序,須執(zhí)行一項(xiàng)定量比色測(cè)試,以判定每個(gè)生產(chǎn)批次的殘留血紅蛋白濃度。
支原體/脲原體:每個(gè)zui終產(chǎn)品批次都要使用大量瓊脂和肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行28天的支原體和脲原體檢測(cè)。我們的檢測(cè)在所采用檢測(cè)方法的檢測(cè)限內(nèi)非常精確。
活力測(cè)試:每個(gè)批次的血清都要使用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行外來(lái)病毒測(cè)試,這種技術(shù)改編自《聯(lián)邦法規(guī)》第9編第113.53部分“對(duì)動(dòng)物來(lái)源成分的要求”。
內(nèi)毒素測(cè)試(LAL):每個(gè)批次都要使用鱟試劑(LAL)測(cè)試進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素測(cè)試,具體操作按照美國(guó)食品藥品管理局和制造商給出的指南進(jìn)行。
總蛋白:要確認(rèn)動(dòng)物年齡和是否符合產(chǎn)品規(guī)格要求,須測(cè)量血清總蛋白。
血清同一性/完整性:每個(gè)批次的血清都要經(jīng)過同一性和完整性測(cè)試。
熱滅活:在56℃條件下進(jìn)行30分鐘血清熱滅活。
生長(zhǎng)促進(jìn):除了通過嚴(yán)格的質(zhì)量控制測(cè)試外,各個(gè)批次的產(chǎn)品還要測(cè)試支持特定細(xì)胞類型體外生長(zhǎng)的活力。如克隆效率,接種效率,細(xì)胞毒性和生長(zhǎng)促進(jìn)。
生化特征:使用下列部分或所有參數(shù)對(duì)不同批次的血清進(jìn)行分析(若有具體要求,請(qǐng)了解各批次的特殊信息):歡迎您致電 華雅再生醫(yī)學(xué)旗艦公司:紅榮微再(上海)生物工程技術(shù)有限公司 :152 1681 4001。華雅再生醫(yī)學(xué)-客服: 316 808 6348
細(xì)胞培養(yǎng)難,難于上青天!縱使小心翼翼,但擋不住的污染,做不出的結(jié)果,總是相伴。實(shí)驗(yàn)過程中充斥的小心謹(jǐn)慎,*樂趣可因胎牛血清的選擇而發(fā)生改變。
來(lái)自澳大利亞純凈之地的饋贈(zèng)——OriCellTM 胎牛血清為血清中的*之品。在為您的細(xì)胞培養(yǎng)提供充足的養(yǎng)分背后,其每一批原材料都經(jīng)嚴(yán)格篩選,GMP車間生產(chǎn)全程可追溯。內(nèi)毒素含量≤5EU/mL,100%不含病原性病毒(BVDV, IBRV, BPIV3),是干細(xì)胞與原代細(xì)胞培養(yǎng)的*。
選擇OriCell *胎牛血清,當(dāng)不期而遇的驚喜、不期而遇的成功出現(xiàn),就足以讓您體驗(yàn)到細(xì)胞培養(yǎng)之趣之美。
OriCell*胎牛血清——產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
■ GMP生產(chǎn)環(huán)境,經(jīng)歐洲藥品質(zhì)量管理局(EDQM)認(rèn)證
■ 經(jīng)3次100nm過濾,內(nèi)毒素含量≤5EU/mL
■ 血紅蛋白含量≤20mg/100mL
■ 總蛋白含量:30~50mg/mL
■ 總IgG<100µg/mL
■ 無(wú)病原性病毒(BVDV, IBRV, BPIV3)
■ 全程可追溯
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 產(chǎn)品規(guī)格 產(chǎn)品價(jià)格
OriCellTM *胎牛血清 100mL 1500元
OriCellTM *胎牛血清 500mL 4500元
Thermo Gibco 10099141 Fetal Bovine Serum, Qualified, Australia Origin 澳洲*胎牛血清產(chǎn)品介紹:
Gibco 10099141 Fetal Bovine Serum, Qualified, Australia Origin 澳洲*胎牛血清 500mL/瓶
產(chǎn)品描述
Sera Category: Secure
Origin: Australia
Endotoxin level: <=10 EU/ml.
Hemoglobin level: <=30 mg (levels routinely <=25 mg).
在中國(guó)境內(nèi), 本產(chǎn)品僅限于非臨床科研用途, 產(chǎn)品信息以中文為準(zhǔn)。 (In China territory, the product is for Research Use only in non-clinical unit, product information in Chinese shall prevail.)
HY StemCell胎牛血清產(chǎn)品訂購(gòu)信息
HY StemCell胎牛血清(澳洲) | HZ0101F | 500ml |
HY StemCell胎牛血清(南美) | HZ0104F | 500ml |
HY StemCell FBS胎牛血清簡(jiǎn)介:
胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。
一、胎牛血清
各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)符合2005版《中華人民共和國(guó)藥典》第三部附錄的要求。
1、性狀、外觀 淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。
2、蛋白質(zhì)含量 3.5%~5.0%( w/v)
3、血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)
4、無(wú)菌檢驗(yàn) 陰性
5、支原體檢驗(yàn) 陰性
6、細(xì)菌內(nèi)毒素 ≤5(EU/ml)
7、牛腹瀉病毒 陰性
8、大腸桿菌噬菌體 陰性
9、支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生長(zhǎng)曲線(接種濃度)zui大增殖濃度≥2.5×106 個(gè)/ml
細(xì)胞倍增時(shí)間 ≤15h
克隆率 ≥85%
HY StemCell FBS胎牛血清的主要成分
胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。
胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。
顯然,胎牛血清是品質(zhì)zui高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分zui少。
牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。
1、提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。
2、提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3、有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4、是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
5、起酸堿度緩沖液作用。
6、提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
Thermo Gibco 10099141 Fetal Bovine Serum, Qualified, Australia Origin 澳洲*胎牛血清
Gibco公司在美國(guó)原裝生產(chǎn)的特級(jí)胎牛血清貨號(hào)是16000-044是100nm過濾3次,內(nèi)毒素和血紅蛋白含量都可以與Hyclone的SH30070.03相媲美。也可以用于培養(yǎng)大部分的干細(xì)胞系。這款16000-044Gibco胎牛血清與Hyclone的特級(jí)胎牛血清,貨號(hào)是SH30070.03的同屬一個(gè)級(jí)別,高品質(zhì)!
一、Thermo Gibco胎牛血清常賣產(chǎn)品列舉如下:
Thermo Gibco 10099133(澳洲)優(yōu)級(jí)胎牛血清 ***受歡迎的FBS產(chǎn)品。高品質(zhì),高價(jià)值,適于各種一般的應(yīng)用
Thermo Gibco 10099141(澳洲)優(yōu)級(jí)胎牛血清 ***受歡迎的FBS產(chǎn)品。高品質(zhì),高價(jià)值,適于各種一般的應(yīng)用
Thermo Gibco 30044333(新西蘭)ES級(jí)別胎牛血清 經(jīng)過ES細(xì)胞的培養(yǎng)測(cè)試,讓您培養(yǎng)ES細(xì)胞時(shí)無(wú)需再預(yù)實(shí)驗(yàn)試批號(hào)
Thermo Gibco C2027005(烏拉圭)胎牛血清(南美)更高性價(jià)比的胎牛血清產(chǎn)品,適合一般細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用
Thermo Gibco C2027010(烏拉圭)胎牛血清(南美)更高性價(jià)比的胎牛血清產(chǎn)品,適合一般細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用
Thermo Gibco C2027050(烏拉圭)胎牛血清(南美)更高性價(jià)比的胎牛血清產(chǎn)品,適合一般細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用
Thermo Gibco 30067185(新西蘭)胎牛血清(透析)經(jīng)克隆和平板效率進(jìn)行性能檢測(cè)適用于放射性同位素示蹤研究
Thermo Gibco 30067334(新西蘭)胎牛血清(透析)經(jīng)克隆和平板效率進(jìn)行性能檢測(cè)適用于放射性同位素示蹤研究
Thermo Gibco 16000044(美國(guó))胎牛血清(美國(guó)來(lái)源)
Thermo Gibco 新生牛血清(NBS)
Thermo Gibco 16010-159新生牛血清(新西蘭)采集自出生20天內(nèi)的新生牛
Thermo Gibco 16010-142新生牛血清(新西蘭)采集自出生20天內(nèi)的新生牛
Thermo Gibco 16050-130馬血清(新西蘭)供體動(dòng)物的EIA檢測(cè)呈陰性
Thermo Gibco 16050-122馬血清(新西蘭)供體動(dòng)物的EIA檢測(cè)呈陰性
Thermo Gibco 26050-070熱滅活馬血清(新西蘭)供體動(dòng)物的EIA檢測(cè)呈陰性56°下加熱30分鐘進(jìn)行熱滅活
Thermo Gibco 26050-088熱滅活馬血清(新西蘭)供體動(dòng)物的EIA檢測(cè)呈陰性56°下加熱30分鐘進(jìn)行熱滅活
Thermo Gibco 16110-082雞血清(新西蘭)采自被人類捕殺用于食用的健康鳥類
Thermo Gibco 16210-064山羊血清(新西蘭)采集自供體動(dòng)物
Thermo Gibco 16210-072山羊血清(新西蘭)采集自供體動(dòng)物
Thermo Gibco 16070-096小羊血清(新西蘭)采集自一歲內(nèi)的動(dòng)物
Thermo Gibco 26250-084豬血清(新西蘭)采集自一歲內(nèi)的動(dòng)物
Thermo Gibco 16120-099兔血清(新西蘭)采集自6個(gè)月內(nèi)的動(dòng)物
Thermo Gibco 16120-107兔血清(新西蘭)采集自6個(gè)月內(nèi)的動(dòng)物
想要了解更多關(guān)于Gibco FBS等級(jí)胎牛血清的價(jià)格、規(guī)格、參數(shù)請(qǐng)致電我公司
二、Hyclone胎牛血清列舉如下:
GE Hyclone SV30087.01(南美普通)胎牛血清 100ML
GE Hyclone SV30087.02(南美普通)胎牛血清 500ML
GE Hyclone SH30370.03(標(biāo)準(zhǔn)型澳大利亞)胎牛血清 500ML
GE Hyclone SH30406.02 (新西蘭)胎牛血清 500ML
GE Hyclone SH30401.01 新生牛血清 500ML
GE Hyclone SH30088.03 標(biāo)準(zhǔn)型胎牛血清500ML
GE Hyclone SH30088.03 標(biāo)準(zhǔn)型胎牛血清500ML
GE Hyclone SH30070.03 北美特級(jí)胎牛血清 500ML
GE Hyclone SH30084.03(澳洲血源)胎牛血清 500ML
GE Hyclone SH30396.03 (加拿大血源)胎牛血清 500ML
GE Hyclone SH30071.03 (優(yōu)等型美國(guó)來(lái)源)胎牛血清 500ML
GE Hyclone SH30074.03 馬血清 500ML
GE Hyclone SH30021.01B DMEM低糖 (DMEM/LOW)500ML
GE Hyclone SH30022.01BDMEM高糖 (DMEM/HIGH)500ML
GE Hyclone SH30243.01BDMEM高糖(含丙酮酸鈉) (DMEM/HIGH)500ML
GE Hyclone SH30023.01BDMEM/F12(1:1) 500ML
GE Hyclone SH30024.01B MEM 500ML
GE Hyclone SH30026.01B F12 500ML
GE Hyclone SH30809.01B RPMI-1640 500ML
GE Hyclone SH30253.01B M199 500ML
GE Hyclone SH30265.01B α-MEM 500ML
GE Hyclone SH30228.01B IMDM 500ML
GE Hyclone SH30030.02B HBSS 500ML
GE Hyclone SH30256.01B PBS 500ML
GE Hyclone SH30028.01B D-PBS 500ML
想要更多的了解Hyclone公司、Hyclone FBS胎牛血清及Hyclone培養(yǎng)基的價(jià)格,規(guī)格,有無(wú)現(xiàn)貨,歡迎您致電 華雅再生醫(yī)學(xué)旗艦公司:紅榮微再(上海)生物工程技術(shù)有限公司 :152 1681 4001。華雅再生醫(yī)學(xué)-客服: 316 808 6348
1、 如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,并避免反復(fù)凍融。
我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若一次無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
2、血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?
沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以,使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃,沉淀會(huì)自然消失。
3、實(shí)驗(yàn)室如何選擇適合的血清?
國(guó)內(nèi)*認(rèn)為HYCLONE的血清是的,但是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷,國(guó)外一般認(rèn)為GIBCO比HYCLONE好,所以并不是價(jià)格決定質(zhì)量,但是總的來(lái)說(shuō)這兩種價(jià)格普遍偏貴,一般不是太嬌氣的細(xì)胞,國(guó)產(chǎn)品牌的胎牛血清就夠用了,例如:HY StemCell胎牛血清(南美血源)就能滿足大部分的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。此外,由于國(guó)內(nèi)HYCLONE,GIBCO并沒有生產(chǎn)線,我們只能從代理商那里買,而代理商又魚龍混雜,所以買到假貨的可能性也很大。所以,HY StemCell為了避免此類現(xiàn)象的發(fā)生,終端客戶可以要求由廠家直發(fā)終端使用者來(lái)保證產(chǎn)品的質(zhì)量。
4、 如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
(1)解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
(2) 血清分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
(4) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。
(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無(wú)須做此步驟。
(6) 若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。
5、 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長(zhǎng)期保存嗎?
一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí),您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_始降解。
6、 為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活血清。
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7、 有必要做熱滅活嗎?
實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或*沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。
若非必須,可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量!
8、細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?
一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁殖,培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。
如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長(zhǎng)狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):
(1)細(xì)胞生長(zhǎng)過老,破碎的細(xì)胞殘骸;
(2)血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;
(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長(zhǎng);
(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格。可應(yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn);
(5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
9、 細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成?
(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。
(2) 培養(yǎng)基無(wú)需37℃水浴。
(3) 培養(yǎng)基保持*PH值7.0- 7.2。
(4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定期刷洗。
(5) 掌握細(xì)胞傳代的*時(shí)機(jī),細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過老。
10、小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項(xiàng)?
來(lái)源不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。
組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng),而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。
血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個(gè)月。解凍血清時(shí) ,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會(huì)增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。