P800蛋白質組學采血管中的蛋白質組學技術的分類說明

　　蛋白質組學技術的發(fā)展已經成為現代生物技術快速發(fā)展的重要支撐，并將生物技術取得關鍵性的突破。為幫助生命科學領域的工作者全面掌握蛋白質組學的技術與方法、實驗難點與關鍵點、研究前沿與熱點，本技術平臺將為客戶提供蛋白組學技術服務，包括雙向凝膠電泳、等電聚焦、生物質譜分析及非凝膠技術。折疊雙向凝膠電泳雙向凝膠電泳的原理是*向基于蛋白質的等電點不同用等電聚焦分離，第二向則按分子量的不同用SDS-PAGE分離，把復雜蛋白混合物中的蛋白質在二維平面上分開。由于雙向電泳技術在蛋白質組與醫(yī)學研究中所處的重要位置，它可用于蛋白質轉錄及轉錄后修飾研究，蛋白質組的比較和蛋白質間的相互作用，細胞分化凋亡研究，致病機制及耐藥機制的研究，療效監(jiān)測，新藥開發(fā)，癌癥研究，蛋白純度檢查，小量蛋白純化，新替代疫苗的研制等許多方面。近年來經過多方面改進已成為研究蛋白質組的zui有使用價值的核心方法。

　　等電聚焦

　　等電聚焦(isoelectric focusing，IEF)是60年代中期問世的一種利用有pH梯度的介質分離等電點不同的蛋白質的電泳技術。等電聚焦凝膠電泳依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離，等電聚焦中，蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續(xù)而穩(wěn)定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸，在電場中形成正極為酸性，負極為堿性的連續(xù)的pH梯度。蛋白質分子在偏離其等電點的pH條件下帶有電荷，因此可以在電場中移動;當蛋白質遷移至其等電點位置時，其靜電荷數為零，在電場中不再移動，據此將蛋白質分離。

　　生物質譜

　　生物質譜技術是蛋白質組學研究中zui重要的鑒定技術，其基本原理是樣品分子離子化后，根據不同離子之間的荷質比(M/E)的差異來分離并確定分子量。對于經過雙向電泳分離的目標蛋白質用胰蛋白酶酶解(水解Lys或Arg的-C端形成的肽鍵)成肽段，對這些肽段用質譜進行鑒定與分析。目前常用的質譜包括兩種:基質輔助激光解吸電離-飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)和電噴霧質譜(ESI- MS)。